Purificazione e caratterizzazione della beta-amilasi

La ß-amilasi è stata purificata e caratterizzata dal Bacillus subtilis isolato dai semi fermentati di Parkia biglobosa. La purificazione è stata ottenuta utilizzando una colonna DEAE a scambio ionico e cromatografia a gel filtrazione (Sephadex G-200). Sono stati studiati gli effetti della temperatura, del pH e del tempo di produzione sulla produzione di ß-amilasi, mentre sono state studiate le caratteristiche fisico-chimiche dell'enzima purificato. La produzione ottimale di ß-amilasi è stata ottenuta a una temperatura, un pH e un tempo rispettivamente di 37 °C, 7,0 e 24 ore. I risultati hanno mostrato che la ß-amilasi purificata aveva un'attività enzimatica maggiore rispetto ai campioni grezzi provenienti dal Bacillus subtilis, in cui l'attività dell'enzima grezzo era di 3,21 mM/min/ml, mentre l'enzima purificato aveva un'attività migliorata di 21,46 mM/min/ml. I valori ottimali di temperatura e pH dell'amilasi purificata sono risultati rispettivamente 50 °C e pH 5,0. La stabilità del pH dell'enzima variava da pH 4,0 a 9,0. A pH 5,0 e 7,0, dopo 5 ore di incubazione, manteneva rispettivamente il 70% e il 60% della sua attività. La stabilità della temperatura variava tra 40 °C e 70 °C, ma era più stabile a 50 °C, conservando il 64% della sua attività dopo 1 ora di incubazione. L'enzima ha mostrato la massima attività su amido solubile e saccarosio.