Oczyszczanie i charakterystyka beta-amylazy

ß-amylaza zostäa oczyszczona i scharakteryzowana z Bacillus subtilis wyizolowanego ze sfermentowanych nasion Parkia biglobosa. Oczyszczanie przeprowadzono przy u¿yciu kolumny jonowymiennej DEAE i chromatografii ¿elowej (Sephadex G-200). Zbadano wp¿yw temperatury, pH i czasu produkcji na produkcj¿ ß-amylazy, a tak¿e w¿äciwo¿ci fizykochemiczne oczyszczonego enzymu. Optymaln¿ produkcj¿ ß-amylazy uzyskano w temperaturze 37oC, pH 7,0 i czasie 24 godziny. Wyniki wykazäy, ¿e oczyszczona ß-amylaza miäa wi¿ksz¿ aktywno¿¿ enzymatyczn¿ ni¿ surowe próbki z Bacillus subtilis, gdzie aktywno¿¿ surowego enzymu wynosi¿a 3,21 mM/min/ml, podczas gdy oczyszczony enzym miä zwi¿kszon¿ aktywno¿¿ wynosz¿c¿ 21,46 mM/min/ml. Stwierdzono, ¿e optymalna temperatura i pH oczyszczonej amylazy wynosz¿ odpowiednio 50°C i 5,0. Stabilno¿¿ enzymu w zakresie pH wynosi¿a od 4,0 do 9,0. Przy pH 5,0 i 7,0 zachowä on odpowiednio 70% i 60% swojej aktywno¿ci po 5 godzinach inkubacji. Stabilno¿¿ temperaturowa wynosi¿a od 40oC do 70oC, ale najbardziej stabilna by¿a w temperaturze 50oC, zachowuj¿c 64% swojej aktywno¿ci po 1 godzinie inkubacji. Enzym wykazywä maksymaln¿ aktywno¿¿ w stosunku do skrobi rozpuszczalnej i sacharozy.